Антиретровирусная активность некоторых видов высших базидиальных грибов - НП Курсив (812) 363-06-28
НП Курсив (812) 363-06-28

+7 (812) 363-06-28


Антиретровирусная активность некоторых видов высших базидиальных грибов


Рытик П.Г., Горовой Л,ф,, Кучеров И.И., Сенюк О.Ф., Мистрюкова Л.О.,

Белорусский НИИ эпидемиологии и микробиологии,

Институт клеточной биологии и генетической инженерии НАН Украины

Использование высших грибов в медицине имеет длительную традицию. В Азиатских странах их издревле применяли для лечения многих заболеваний. В Западном полушарии пристальный интерес к ним как к потенциальным лечебным средствам стали проявлять лишь в прошлом веке. Известно, что доля полезных грибов среди открытых составляет не более 5%, тогда как изученные и используемые в пищевой и медицинской промышленности встречаются совсем редко. (1).

Специалисты, изучавшие вегетацию грибов, допускают, что непременным условием их сохранения как вида является образование и присутствие в строме антибактериальных и антифунгиальных химических структур. Если это так, то нет ничего удивительного в том, что из некоторых видов могут быть изолированы полезные для человека компоненты. Среди зарекомендовавших себя лечебных препаратов широкую известность приобрели лишь те, которые выделены из микроскопических грибов. Достаточно упомянуть в этой связи о пенициллине и др. антибиотиках. В настоящем сообщении мы обратимся только к тем представителям высших грибов, экстракты которых обладали антивирусными свойствами. Так, в обзоре Brandt et al. (2) приводятся многочисленные примеры выявления антивирусного эффекта как у цельных экстрактов, так и отдельных фракций некоторых видов базидиальных грибов. Механизм антивирусного действия отличался  разнообразием: отдельных случаях эффект обеспечивался воздействием на продукцию вирусных ферментов, а в других - на синтез нуклеиновых кислот вирионов или на фазу адсорбции их рецепторами клетки-хозяина. Крупные молекулы (полисахариды и др. комплексы) воздействовали опосредованно, стимулируя реакции иммунитета.

Motana et al. (3) сообщают, что экстрагированные из Ganoderma pfeifferi тритерпены, в частности, ганодермадиол, люцидадиол, аппланоксидевая кислота G ингибировалиin vitro вирус гриппа А. Первое из упомянутых соединений было также активно и в отношении вируса простого герпеса 1-го типа. Другие исследователи (El-Mekkawy et al.), изучая экстракты из Ganoderma lucidum (Рейши), обнаружили выраженную активность, направленную на ВИЧ-1. Так, даже чрезвычайно малая доза ганодериола F и ганодерманонтриола (7,8 мг/мл) полностью прекращали репликацию ВИЧ, выращиваемого на клеточной линии МТ-4. Сходный эффект отмечали Ichimura et al.: воднорастворимые лигнины из Inonotus obliquus ингибировали протеазу ВИЧ-1 (5). Tochikura et al. (6,7) и Suzuki et al. (8) регистрировали выраженную анти-ВИЧ-активность питательной среды, используемой для выращивания мицелия Lentinus idodes (Шиитаке). Механизм ингибиции авторами не изучался. Colins (9) и Wang (10) пошли дальше. Первый из них, изучавший Coriolus versicolor, доказал, что получаемые им полисахаридно-белковые комплекс активно препятствовали адсорбции ВИЧ CD4 (+)- лимфоцитами. Второй, на примере выделенного из Flammulina velutipes низкомолекулярного белкового комплекса, привел убедительное подтверждение тому, что экстракт грибов могут нейтрализовать вирусную обратную транскриптазу.

Все приведенные выше факты явились для нас побудительным мотивом для поиска противовирусных средств из местных высших базидиальных грибов.

Испытаниям подверглись 7 природных меланин-глюкановых комплексов, полученных экстракцией из высших грибов вида Inonotus obliquus (препараты №№357, 358 и МГК-7), Lentinus edodes (МГК-8), Ganoderma applanatum (МГК-9), Phellinus igniarius (МГК-10) и Fomes fomentarius (МГК-11). Для исследований использовались перевиваемые Т-лимфобластоидные линии CEM.SS и МТ-4, инфицированные высокорепликативным штаммом ВИЧ-1. Рабочая доза вируса находилась в пределах 6,0-8,0 IgТЦД50. Ингибирующий эффект оценивался тремя различными тестами: формазановая реакция (ФТ), окраска инфицированной клеточной линии витальным красителем трипановый синий (ОТС) и реакция непрямой иммунофлюоресценции (НИФ). Во всех случаях исследования базировались на результатах так называемой терапевтической схемы контроля (испытуемые препараты вносились в культуральную среду одновременно с вирусом). Итоговые данные испытаний приведены в таблице 1.

Таблица 1. Диапазон антиретровирусной активности меланин-глюкановых комплексов из высших базидиальных грибов

№357

№358

МГК-7

МГК-8

МГК-9

МГК-10

МГК-11

ФТ

Диапазон активных концентраций (мкг/мл)

10,0-0,4

10,0-0,4

100,0-0,8

100,0-0,8

100,0-0,8

100,0-0,8

100,0-0,8

Максимальная переносимая концентрация (мкг/мл)

400,0

400,0

500,0

500,0

500,0

500,0

500,0

Минимальная эффективная концентрация (мкг/мл)

0,4

0,4

0,8

0,8

0,8

0,8

0,8

Химио-терапевтический индекс (соотношение МПК к МЭК)

1000

1000

625

625

625

625

625

ОТС

Диапазон активных концентраций (мкг/мл)

50,0-10,0

50,0-10,0

100,0-0,8

100,0-4,0

100,0-0,8

100,0-0,8

100,0-20,0

Максимальная переносимая концентрация (мкг/мл)

400,0

400,0

500,0

500,0

500,0

500,0

500,0

Минимальная эффективная концентрация (мкг/мл)

10,0

10,0

0,8

4,0

0,8

0,8

20,0

Химио-терапевтический индекс (соотношение МПК к МЭК)

40

40

625

125

625

125

25

НИФ

Диапазон активных концентраций (мкг/мл)

100,0-4,0

100,0-4,0

500,0-4,0

100,0-20,0

100,0-4,0

100,0-4,0

500,0-4,0

Максимальная переносимая концентрация (мкг/мл)

400,0

400,0

500,0

500,0

100,0

100,0

500,0

Минимальная эффективная концентрация (мкг/мл)

4,0

4,0

4,0

20,0

4,0

4,0

4,0

Химио-терапевтический индекс (соотношение МПК к МЭК)

100

100

125

25

25

25

125

 

Даже беглый анализ приведенных в таблице результатов позволяет убедиться в проявлении препаратами высокой степени противовирусной активности. Особенно это относится к соединениям, полученным из грибов вида Inonotus obliquus. Кумулятивный критерий эффективности препарата - химиотерапевтический индекс - свидетельствует одновременно как о слабой токсичности вещества, так и о его чрезвычайно высокой активности. Существенные расхождения в уровнях ингибирующей вирус активности, проявляемой одним и тем же препаратом (МЭК - минимальная эффективная концентрация соединений №357 и 358 колебалась в разных опытах от 0,4 до 10,0 мкг/мл) отражают лишь разную степень чувствительности каждого из использованных методических приемов. Среди других проверенных биологически активных соединений выделяются комплексы МГК-7,9,11. По всем критериям, им следует отдать предпочтение при выборе кандидатов потенциальных средств из арсенал химиотерапии ВИЧ-инфекции.

Работа выполнена при финансовой поддержке фонда фундаментальных исследований Беларуси (проектБ05К-014).

 

Литература

1. Lindequist U., Niedermeyer THL., and Juelich WD. The Pharmacological Potential of mushrooms. CAM, 2005? 2 (3): 285-299.

2. Brandt CR., Piraino F Mushroom antivirals. Resent Res. Dev. Antimicrob. Agents Chemother. 2000, 4: 11-26.

3. Motana RAA, Awadh NAA, Jansen R. et al. Antiviral Ianostanoid triterpenes from the fungus Ganoderma Pfeifferi BRES. Fitoterapia 2003; 74: 177-180.

4. El-Mekhawy S., Meselhy MR, Nakamura N. et al. Anti-HIV-1 and anti-HIV-1-protease substances from Ganoderma Lucidum. Phytochemistry. 1998; 49: 1651-1657.

5. Ichimura T., Watanabe O., Maruyama S. Inhibition of HIV-1 protease by water-soluble lignin-like substance from an edible mushroom. Fuscoporia obligua. Biosci. Biotechnol Biochem 1998; 575-577.

6. Tochikura TS, Nakashima H, Ohashi Y et al. Inhibiton (in vitro) of replication and of the cytopathic effect of HIV by extract of the culture medium of Lentinus edodes mycelia. Med. Microbiol. Immunil. 1998; 177: 235-244.

7. Tochikura TS, Nakashima H, Hirose K et al. A biological response modifier. PSK, inhibits HIV in vitro. Biochem. Biophys Res. Commun 1987; 148: 726-733.

8. Suzuki H, Okubo A, Yamazaki S et al. Inhibition of the infectivity and cytopathic effect of HIV by water-soluble lignin in an extract of the culture medium of Lentinus edodes mycelia. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989; 160: 367-373.

9. Colins RA., Ng TB. Polyaccharopeptide from Coriolus versicilir has potential for use against HIV-1-infection. Life Sci. 1997; 60: PL 383-387.

10. Wang HX, Ng TB. Isolation and characterization of vecutin, a novel low-molecular-height ribosom-inactivating protein from winter mushrooms (Flammulina velutipes) fruiting bodies. Life Sci. 2001; 68: 2151-2158.

 

 
Санкт-Петербург, Большой пр.П.С. 29 а, офис 401 , тел. (812) 363-06-28
Free joomla themes
Extensions by Siteground Web Hosting